O caminho para a nova terapia genética 7 etapas para induzir a dieta biomédica para artrite reumatóide em ayurveda

Com o trio de aprovações de terapia gênica da Food and Drug Administration em 2017, foram abertas as inovações que afetam a osteoartrite no quadril 10. As empresas farmacêuticas e de biotecnologia estão tentando capitalizar uma abordagem terapêutica revolucionária que já foi considerada muito arriscada. Com promissores resultados clínicos de terapias genéticas precoces, o dinheiro do capital de risco está finalmente liberando para permitir essa próxima geração de medicamentos.

No entanto, mesmo os programas de terapia gênica mais bem financiados são extremamente complexos para navegar através do desenvolvimento pré-clínico. Esses testes de segurança e eficácia, necessários antes que as drogas possam ser estudadas em seres humanos, talvez sejam o estágio mais perigoso de todo o processo de desenvolvimento.

As empresas farmacêuticas devem projetar estudos que demonstrem, com dados sólidos, que a terapia é segura e eficaz antes que os reguladores considerem adequado para a dosagem em pacientes.

As apostas não poderiam ser mais altas. Dependendo do resultado dos estudos de segurança pré-clínica e de biodistribuição, as terapias gênicas investigativas passarão para o estágio final da revisão do FDA ou fracassarão, levando os cientistas de volta à estaca zero.

A Lovelace Biomedical conduz estudos de segurança e biodistribuição em terapias gênicas investigativas há mais de uma década, tornando-se um dos programas de terapia gênica mais antigos do país no espaço pré-clínico. Com projetos recentes de terapia gênica em fibrose cística, doença de Pompe e uma variedade de outras doenças raras com uma necessidade crítica do paciente, a equipe Lovelace entende as nuances de projetar e implementar um programa pré-clínico que apóia uma submissão do IND que responde a todas as questões regulatórias.

Aqui, com informações de toda a equipe de terapia genética da Lovelace, fornecemos uma visão interna das etapas que a maioria dos patrocinadores de medicamentos deve adotar ao promover uma possível terapia gênica por meio de estudos pré-clínicos para eventual aprovação regulatória. Uma coisa é clara: não existe um caminho de corte de biscoitos para produtos de terapia gênica. Em um espaço terapêutico emergente, cada passo requer uma abordagem personalizada e altamente informada.

Como é a artrite reumatóide fatal o DNA corretivo no núcleo de uma terapia genética ser entregue nas células dos pacientes? Normalmente, a resposta é através de um vírus. Adeno vírus associados (AAV), adenovírus e lentivírus são mais comumente usados ​​como vetores para a entrega de drogas. Esta escolha depende da abordagem terapêutica: os vetores AAV fornecem expressão gênica de longo prazo e subtipos de ocorrência natural (sorotipos), o que permite alguma especificidade de tecido-alvo. Os vetores de adenovírus podem ser ótimos quando a expressão gênica de curto prazo é o objetivo. E lentivírus são mais frequentemente utilizados para transferir material genético para células de pacientes em cultura (medula óssea ou células do sangue) que são posteriormente injetadas artrite em cães joelho de volta para o paciente como terapia para tratar deficiências imunes ou anemia falciforme.

Outros modos de entrega gênica incluem lipossomas (partículas lipídicas) e nanopartículas que podem ser projetados para direcionar tipos específicos de células para o parto. A vantagem com estes é que eles não produzem respostas imunes que estão associadas ao uso do vetor viral.

“É preciso levar o vetor ao tecido, convencer as células a incorporar o vetor e depois obter o material genético para expressar o gene”, diz o diretor científico da Lovelace, Jake McDonald. “Para a maioria das terapias genéticas em desenvolvimento, que procuram fornecer um tratamento curativo para condições hereditárias, você quer que os pacientes expressem esse gene pelo resto de suas vidas.”

A via de administração do fármaco depende do órgão ou tecido alvo onde o gene defeituoso é expresso. Por exemplo, com terapias oculares, articulares ou direcionadas ao cérebro, o vetor é entregue diretamente ao olho, articulação ou fluido cerebral ou espinhal. No caso da doença de Pompe, que danifica as dores musculares e nervosas do pé da artrite reumatóide durante a noite em todo o corpo, o vetor é dado por via intravenosa ou no diafragma ou músculo esquelético. Para terapias cardíacas, o fármaco pode ser administrado através de cateter para os vasos coronários, ou diretamente aplicado à superfície do coração. Para a deficiência de alfa-1 antitripsina, um distúrbio genético que causa problemas nos pulmões e no fígado, o vetor é administrado por via intravenosa ou no espaço pleural entre as costelas e o pulmão.

Quanto ao momento da terapia, esta também é uma consideração importante para estudos pré-clínicos. Com doenças hereditárias, é ideal entregar o medicamento ao feto ou à criança logo que possível após o diagnóstico. No entanto, com poucas exceções, a FDA exige testes em adultos ou crianças com pelo menos 12 anos de idade antes de permitir o parto para bebês ou crianças pequenas.

“Essas decisões são críticas, pois os pacientes só têm uma chance de artrite nos pés e pés na terapia genética”, disse McDonald. “Depois que o corpo é exposto ao novo material genético uma segunda vez, o sistema imunológico ajustará os anéis para os dedos artríticos rejeitá-lo. Novas tecnologias estão em desenvolvimento que podem evitar esse desafio, mas essa tem sido a situação até hoje ”.

Exceto nos casos em que o vetor é administrado a espaços confinados como o olho ou articulação, a experiência tem mostrado que a terapia gênica será distribuída para locais fora do alvo. No entanto, este efeito indesejado pode ser diminuído pela incorporação de “promotores” dentro do vetor para limitar ou controlar a expressão gênica. Alguns promotores únicos têm sensibilidade à luz ou tensão de oxigênio para controlar a expressão gênica. Com a doença de Pompe, um promotor específico da desmina limita a expressão a um conjunto limitado de tecidos, incluindo o músculo, embora o vetor AAV se distribua pelo sangue para a maioria dos tecidos do corpo.

A escolha de uma espécie para testes pré-clínicos de terapias gênicas é uma das decisões mais desafiadoras do desenho do estudo. Isso porque a maioria das terapias genéticas procura tratar doenças raras, que podem ser difíceis ou impossíveis de se replicar em um animal.

Alguns modelos terão uma mutação que ocorre naturalmente, enquanto outros são a dieta de artrite reumatóide tamil geneticamente modificada (como visto no modelo knockout GAA da doença de Pompe ou modelo de camundongo Sandoff da doença de Tay Sachs). Modelos animais podem ser desenvolvidos quimicamente, como na osteoartrite induzida por mono-iodoacetato, ou através de meios físicos, como na insuficiência cardíaca em porcos induzidos por oclusão vascular ou estimulação elétrica. Além disso, o patrocinador pode conduzir estudos in vitro para demonstrar à FDA que uma dada terapia será tomada por células de uma espécie escolhida de maneira semelhante à captação em células humanas, ou que os receptores que são alvejados em células humanas também são presente na espécie animal.

“Pode haver muitas camadas de complicações influenciando a decisão do patrocinador de drogas aqui”, disse McDonald. “Você está entregando uma artrite humana no gene dos sintomas da clavícula a um animal. E um animal pode ou não responder à proteína humana da mesma forma que uma proteína de sua própria espécie. Essa é uma das razões pelas quais uma empresa pode decidir avaliar sua terapia em duas espécies, como o rato e o primata não-humano. ”

A justificativa para as espécies usadas deve ser justificada no pacote pré-IND e no IND – e isso é algo para o qual Lovelace traz uma visão ampla. Por exemplo, enquanto primatas não humanos podem servir como modelo de doença para certas condições, muitos primatas naturalmente têm algum nível de anticorpos neutralizantes para o vetor que é usado para administrar as bolas de artrite para terapia genética de mãos – o que significa que o animal não mostraria resposta a um gene terapia. Por essa razão, todos os primatas não humanos devem ser pré-selecionados.

Neste estágio de pesquisa, é essencial ter os melhores talentos veterinários do seu lado. Ao medir a doença e a resposta ao tratamento em um modelo animal, a equipe deve ser capaz de distinguir entre a doença em si e os efeitos toxicológicos do tratamento, o que requer habilidade e experiência. Em alguns casos, os cientistas avaliam a eficácia e a segurança ao mesmo tempo e no mesmo modelo.

Muitos fatores são levados em conta ao projetar o estudo pré-clínico, a partir do número de grupos de dose, número de animais por grupo de dose, tipos de controles e número de pontos de tempo de amostragem de ponto final. A menos que uma doença genética ocorra em apenas um sexo, ambos os sexos são incluídos nos estudos de segurança e biodistribuição. Na maioria dos casos, pelo menos duas doses de vetor são usadas. Múltiplos pontos de tempo de amostragem são incluídos, começando no ponto em que a expressão vetorial deve atingir o pico (geralmente de 7 a 14 dias) e estendendo-se por vários meses a um ano.

Endpoints comuns para um estudo de terapia gênica incluem: peso corporal, sinais clínicos, hematologia, química sérica, vetor de biodistribuição (como avaliado por PCR), expressão gênica no tecido alvo e em tecidos com uma grande concentração pré-especificada de capsídeo vetorial do vírus), os anticorpos neutralizantes da artrite associam siracusa no soro à proteína e transgene da cápside, respostas imunes (mediada por células T à proteína do capsídeo e proteína expressa) e histopatologia (e imunohistoquímica para avaliação microscópica da expressão gênica). Outros pontos finais podem ser incluídos, dependendo da doença. Outro ponto importante a ser observado aqui: se o patrocinador de medicamentos estiver buscando aprovação regulatória na Europa, uma etapa adicional pode ser necessária para avaliar a concentração de vetores em fluidos corporais e excrementos de ondas de artrite reumatóide para determinar o derramamento.

Depois que os resultados pré-clínicos são avaliados usando as ferramentas e os relatórios bioanalíticos mais recentes, é hora de completar a aplicação IND – mostrando os dados fortes que indicam que sua droga está pronta para o teste em pacientes. Todos os estudos pré-clínicos de segurança para terapias gênicas são conduzidos sob as diretrizes da Good Laboratory Practice (GLP). Um relatório final auditado com dados resumidos, estatísticas e apêndices contendo relatórios de cientistas contribuintes e dados de animais individuais é submetido ao patrocinador para inclusão no pacote IND.